1、用过滤和脱气的流动相（不含缓冲盐）*冲洗色谱仪的泵和管路，务必使系统中不含气泡。

 

　　2、根据色谱柱上所标示的流动相流向，将色谱柱入口与泵端管路相连，柱出口不连。

 

　　3、将泵的流速设为0.1mL/min或更低，流速缓慢地上升到正常流速。

 

　　4、当溶剂从色谱柱出口端自由流出时，将流速设为0，把柱出口与检测器端的管路相连。

 

　　5、用10－30倍柱体积的流动相、正常流速平衡色谱柱。

 

　　6、氨基柱、氰基柱既可在正相环境下使用，也可在反相环境下工作。当需要从反相变为正相或正相变为反相时，需要用20－30倍柱体积的THF作为过渡溶剂冲洗系统，否则易使泵的单向阀堵塞，出现压力异常的现象。

 

　　19095F-123色谱柱使用过程中，如果压力升高，一种可能是烧结滤片被堵塞，这时应更换滤片或将其取出进行清洗；另一种可能是大分子进入柱内，使柱头被污染；如果柱效降低或色谱峰变形，则可能柱头出现塌陷，死体积增大。

 

　　在后两种情况发生时，小心拧开柱接头，用洁净小钢将柱头填料取出再把柱内填料整平。然后用适当溶剂湿润的固定相(与柱内相同)填满色谱柱，压平，再拧紧柱接头。

 

　　这样处理后柱效能得到改善，但是很难恢复到新柱的水平。柱子失效通常是柱端部分，在分析柱前装一根与分析柱相同固定相的短柱，可以起到保护、延长柱寿命的作用。采用保护柱会损失一定的柱效，这是值得的。

 

　　通常色谱柱寿命在正确使用时可达2年以上。以硅胶为基质的填料，只能在pH=2～9范围内使用。柱子使用一段时间后，可能有一些吸附作用强的物质保留于柱顶，特别是一些有色物质更易看清被吸着在柱顶的填料上。